Claudin（CLDN）蛋白是上皮細胞緊密連接的重要組成之一，其異常表達或失調會導致上皮細胞和內皮細胞的結構損傷和功能受損，已成為包括腫瘤、炎症性腸病、皮膚病在內的多種疾病的治療靶标或生物标記物[1]。腫瘤适應症是CLDN靶點新藥研發最受關注的領域之一，尤其是靶向CLDN18.2藥物在胃癌領域的應用，是近幾年備受追捧的投資研發熱點。

Claudin的發現和分類

Claudin於1998年被Shoichiro Tsukita及其同事克隆并命名。“Claudin”的名字來源於拉丁語“claudere（關閉）”，已經表明了這些蛋白質的屏障作用。

Claudins是一類存在於上皮和內皮間頂端的膜蛋白，具有四個跨膜結構域，包括位於細胞質中的N端和C端，以及兩個胞外結構域。N端通常很短（4-10個氨基酸），而C末端包含21-63個氨基酸，是這類蛋白質在緊密連接中定位所必需的[2]。胞外結構域的第1個細胞外環由大約53個氨基酸組成，第2個環大約有24個氨基酸。

上皮細胞的細胞間粘附主要通過粘附連接和緊密連接兩種類型保持。其中，緊密連接由閉合蛋白（Occludin）、緊密蛋白（Claudin）、連接粘附分子（JAM）、ZO蛋白等成分組成，在上皮細胞層中發揮屏障功能和栅欄功能，調節離子、水和各種大分子甚至癌細胞通過細胞旁路通道，在上皮細胞的增殖、存活、凋亡和分化中具有重要作用[2]。

Claudin是一個多基因家族，目前在哺乳動物中至少發現了27個CLDN成員。根據其蛋白序列相似度，分為經典緊密蛋白（1-10、14、15、17、19）和非經典緊密蛋白（11-13、16、18、20-24），這也反映在細胞外環1和2的衍生序列-結構功能關系中。根據蛋白序列的相似度來區分Claudin的類型最早是應用在小鼠的CLDN分析中，随後拓展至人的CLDN蛋白分析中[2,4]。此外，CLDN還可以根據生理功能分為成孔蛋白和封閉蛋白[5]。

2001年，Tomoaki Niimi等人分離并表征了CLDN基因家族的重要新成員——Claudin 18（CLDN18）[6]。人類 CLDN18 基因位於22号染色體長臂q3，基因全長35 kb。CLDN18通過選擇性剪接會表達兩種亞型蛋白，即CLDN18.1和CLDN18.2。這兩種蛋白異構體均由261個氨基酸組成，同樣具有四個跨膜結構域，蛋白序列高度同源，僅在N端（ECL1）和第一個細胞外環大約50個氨基酸的序列中有7個氨基酸殘基差異[7-9]。

從表達位置上看，CLDN18是肺和胃上皮細胞緊密連接的主要成分，CLDN18.1主要在肺細胞中表達，CLDN18.2則主要表達在胃上皮細胞中。正常生理條件下，CLDN18.2不在任何健康組織中表達，僅在胃粘膜上的分化上皮細胞中表達。随着研究進展，發現CLDN18.2在胃癌、胰腺、食管、卵巢、乳腺癌、肺癌等原發性惡性腫瘤中高表達或異位激活[9]，鑒於其特異表達的潛質，CLDN18.2已經成為抗腫瘤的新興靶标。

CLDN18.2走紅：九轉功成，天下盡知

CLDN18.2并非“一夜突然爆紅”，能夠成為當下備受行業關注的潛力靶标也要歸功於Ganymed公司的堅持和努力。2013年ASCO會議，Ganymed攜IMAB362亮相，公布了II期臨床有效性數據，在31例難治性轉移性胃食管腺癌患者中評估的ORR為13%[10]，這樣的數據或許并沒有引起行業的充分重視。2014年，Ganymed攜帶IMAB362再次亮相AACR會議[11]，公布了針對胰腺癌臨床前研究數據，并在早些時候獲得FDA針對該疾病的孤兒藥認證。

2016年是CLDN18.2真正的轉折點。Ganymed再一次攜帶IMAB362的臨床數據亮相ASCO，并以LBA（Late-breaking Abstract）形式發布，成為當年的會議黑馬。納入研究的晚期/複發性胃癌和GEJ 患者，随機接受EOX（表柔比星、奧沙利鉑和卡培他濱）或EOX聯合IMAB362治療。數據顯示，IMAB362聯合EOX顯著改善mPFS（4.8 vs 7.9m, HR 0.47，p=0.0001）和mOS(8.4 vs 13.2, HR 0.51)，mOS顯著延長4.8個月，降低死亡風險49%。

在 CLDN18.2高表達亞群中，改善mOS的療效更加明顯（9.3 v 16.6 m；HR 0.44），死亡風險降低56%，IMAB362随即引起廣泛關注。

2016年10月，安斯泰來和Ganymed達成收購協議，支付4.22億歐元收購Ganymed全部股權，并將根據IMAB362和其他臨床項目的開發進展再次支付高達8.6億歐元裡程金；12月，安斯泰來完成收購，Ganymed成為其全資子公司。優異的臨床數據和備受關注的交易并購促成了CLDN18.2靶标藥物的開發熱潮。

CLDN18.2開發競速：群狼環伺，誰主沉浮？

時下，CLDN18.2成為最熱門的腫瘤研發投資靶點之一。根據醫藥魔方NextPharma數據，全球在研的CLDN18.2相關項目已經多達60個，與中國公司相關的有47個，占比近80%。僅從CLDN18.2項目數量上看，國內公司中凱地生物、創勝集團、天廣實等位居前列。

開發進度方面，全球CLDN18.2項目進入臨床開發的共有20款（33%），但是僅有安斯泰來收購的IMAB362（claudiximab）進入到III期階段，創勝集團的TST001進入到II期臨床，其他項目基本都處於早期階段，并且項目背後全部是中國公司的身影。可以說，圍繞CLDN18.2的競争，國內企業已成“群狼環伺”之勢。

目前國內布局CLDN18.2的企業數量較多，項目開發和投資的聲勢浩大。從藥物類型上看，也是涉及單抗、雙特異性抗體、抗體偶聯藥物（ADC）、CAR-T細胞療法等多種類型，可謂百花齊放。但從進度上看，國內大多數CLDN18.2項目尚處於臨床早期開發階段，能用臨床數據進一步評估潛在優勢以及成藥前景的項目少之又少。

不同類型的藥物，在産業化開發時有不同的考量。就CLDN18.2靶點而言，單抗類藥物過往已經積累了比較豐富和成熟的技術開發、商業化生産、成本控制經驗，監管制度健全，醫生臨床使用方面也有保障，無疑會是主流，所以在研的CLDN18.2項目還是以單抗居多。當然，患者抗原表達降低、突變導致抗體親和力下降等常見耐藥性問題也是CLDN18.2單抗藥物開發時需要考慮的問題。

CLDN18.2 ADC藥物在應對單抗藥物的耐藥性方面理論上會有一些優勢，不過也面臨ADC藥物通常面臨的障礙。一方面是生産工藝複雜，國內企業較少自身具備相關産能，更多是采用CDMO完成，生産成本的優勢肯定不及單抗。另一方面是ADC藥物針對CLDN18.2這種新靶點的ADC藥物臨床開發和臨床使用經驗都有待積累；此外，由於攜帶毒素，CLDN18.2 ADC的臨床開發無論是單藥還是聯用，都要重點關注安全性問題。CLDN18.2雙抗、CLDN18.2 CAR-T療法都算是藥物中最新的技術形式，比較大的挑戰自然還是生産、監管和定價。由於目前針對CLDN18.2 的雙抗、CAR-T療法尚未見到臨床數據，暫不過多讨論。

國內企業目前在CLDN18.2靶點上都還沒有披露重大突破性的臨床數據，目前的競争主要還是看企業的臨床開發計劃和推進速度，以及在競争白熱化的國內環境下，各家公司的國際化拓展步伐。從這一點來看，創勝集團在CLDN18.2賽道上擁有領軍優勢。一方面，創勝集團的TST001是中國首個進入II期臨床試驗的CLDN18.2單抗，由消化腫瘤領域頂級專家、北京大學腫瘤醫院副院長沈琳教授擔任PI，在适應症上瞄準胃癌的二線一線用藥進行了涵蓋單藥和聯合療法開發的全面布局，可以說是把公司的開發資源集中在了TST001身上；另一方面，TST001也是首個進入中美兩地同步開發的CLDN18.2項目，在7月28日剛剛獲得FDA授予的治療胃癌及胃食管連接部癌的孤兒藥資格。所以創勝在CLDN18.2單抗的适應症布局和國際化開發上具有一定先發優勢。

國內其他CLDN18.2玩家中，與創勝集團在臨床進度上比較接近的是科濟的單抗藥物AB011，正在開展I期研究，但是相比TST001公開的信息數據就很少了，後續可以保持關注。除此之外，近期也有不少實力強勁的公司在CLDN18.2賽道上取得進展，比如榮昌生物的CLDN18.2 ADC藥物RC118獲得澳洲臨床許可、石藥集團的CLDN18.2 ADC藥物獲得臨床許可等。此外，布局較早的企業已經開始公布早期臨床進展，包括創勝集團已經公布TST001的劑量爬坡數據、科濟藥業也宣布將在ESMO公布CAR T項目CT041研究者發起的試驗進展。

整體而言，國內CLDN18.2賽道的競争不可謂不激烈，也有部分玩家積累顯現了一定的優勢，但是目前的競争還停留在早期階段，并未分出絕對勝負，期待後續有更多突破性臨床數據展示。

TST001：先行先至，期待突破

作為國內首個進入II期臨床和首個進行中美同步開發的CLDN18.2項目，同時也是國內開發進度最快的CLDN18.2項目，TST001目前已經獲得并披露了初步的療效數據，在此做一簡單介紹。

與Claudiximab的人鼠嵌合型抗體不同，TST001是由創勝集團通過其免疫耐受突破 (IMTB) 技術平台開發的一款重組人源化單克隆抗體，利用先進的生物加工技術較低了岩藻糖含量，增強了Fc受體結合能力，實現了更強的抗體依賴性細胞毒性 (ADCC) 和補體依賴性細胞毒性 (CDC)作用。

在2020 AACR會議上披露的臨床前數據顯示，TST001表現出了優異的靶标選擇性，相比Claudiximab（IMAB362）也顯示出增強的ADCC效應和細胞殺傷作用。

其次，在CLDN18.2表達陽性患者來源的異種移植腫瘤模型中，TST001相較於IMAB362顯示出更有效的抗腫瘤活性和聯合用藥潛力。

2021年7月，創勝集團公布了TST001正在美國和中國開展的劑量爬坡研究初步數據。根據RECIST1.1标準，在6mg/kg的劑量組的3名病人中，1名接受過多線治療（化療、PD1和VEGF抑制劑）失敗的晚期胃癌患者，在治療近6周後達到部分緩解，腫瘤生物标志物也明顯減少，此病人在第12周的複查中被确認為持續部分緩解；另外，在TST001聯合CAPOX治療一線胃癌的研究中，第一個劑量組中的1名患者在治療6周後也獲得了部分緩解。在現有劑量數據下，無論是單藥或聯合治療，TST001均顯示了良好的安全性。

創勝集團已啟動TST001單藥治療 Claudin18.2 表達陽性實體瘤（包括胃癌、胰腺癌等其他腫瘤）的IIa期臨床研究。如果後續能有進一步的出色臨床數據支持，也不排除有跟海外公司進行BD交易的可能性。尤其是TST001在美國獲得了針對胃癌适應症的孤兒藥資格認定，可以享受到臨床試驗費用50%稅收減免、免除數百萬美元的NDA申請費用、該适應症獲批上市後可獲得美國市場7年獨占期等一系列政策激勵，成為吸引BD合作的有利條件。

創勝集團目前在北京、上海、廣州和美國普林斯頓分别設有臨床開發中心，并在美國波士頓和洛杉磯設立了對外合作中心，能夠更有利於公司推進TST001的美國臨床開發和與FDA的溝通，以及與潛在的BD交易夥伴溝通談判，TST001的後續開發值得關注。

結語

CLDN18.2可以說是胃癌領域的實力靶點。作為中國第二高發惡性瘤種，胃癌的患者群體僅次於肺癌，龐大的潛在市場或許也是促成國內企業“群狼環伺”的原因。不過，對於CLDN18.2，也不應盲目樂觀，特别是國內企業在該領域的布局占比接近全球80%。

在當前國內創新藥Fast Follow戰略下，産品的開發速度顯得更加重要。特别是《以臨床價值為導向的抗腫瘤藥物臨床研發指導原則》實施之後，如果産品沒有顯著的臨床優勢，已經無法叩開商業化的大門。因此，對於國內企業而言，能否抓住和利用上市監管與商業化的“窗口期”，對其創新藥産品能否實現最終商業化價值兌現至關重要。

參考資料：

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2. Lei Ding，et al. The claudin family of proteins in human malignancy: a clinical perspective. Cancer Management and Research 2013:5 367–375

3. Amar B Singh，et al. Claudin Family of Proteins and Cancer: An Overview. Journal of Oncology,Vol2010:1-11; doi:10.1155/2010/541957

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6. TOMOAKI NIIMI，et al. claudin-18, a Novel Downstream Target Gene for the T/EBP/NKX2.1 Homeodomain Transcription Factor, Encodes Lung- and Stomach-Specific Isoforms through Alternative Splicing. MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY, Nov. 2001, p. 7380–7390

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9. Ugur Sahin, et al. Claudin-18 SpliceVariant 2 Is a Pan-Cancer Target Suitable for Therapeutic Antibody Development. Clin Cancer Res 2008;14(23):7624-7634

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